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灵芝母种培养基配方有几种?灵芝母种培养基如何制作?

2020-5-8 20:15| 发布者: 食芝不倦| 查看: 98| 评论: 0

摘要:   灵芝母种培养基主要供母种转管、保藏及分离、提纯用。一般分为斜面、半高层、高层和平板4种类型。其中最常用的为斜面培养基,它是采用试管分装,灭菌后摆制成斜面而得名。近期有种植灵芝的网友咨询耕种帮:灵芝 ...

  灵芝母种培养基主要供母种转管、保藏及分离、提纯用。一般分为斜面、半高层、高层和平板4种类型。其中最常用的为斜面培养基,它是采用试管分装,灭菌后摆制成斜面而得名。近期有种植灵芝的网友咨询耕种帮:灵芝母种培养基配方有几种?灵芝母种培养基如何制作?以下耕种帮灵芝网就作简单介绍,供网友们参考。 



灵芝母种培养基配方有几种?灵芝母种培养基如何制作? 

  灵芝母种培养基配方

  1、马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯(去皮)200克、葡萄糖20克、琼脂20克、水1000毫升。

  2、马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA):马铃薯(去皮)200克、蔗糖20克、琼脂20克、水1000毫升。

  3、马铃薯综合培养基(CPDA):马铃薯(去皮)200克、葡萄糖20克、磷酸二氢钾3克、硫酸镁1.5克、维生素B1 10毫克、琼脂20克。

  4、完全培养基(RM):蛋白质2克、葡萄糖20克、磷酸二氢钾0.46克、磷酸氢二钾1克、硫酸镁0.5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。

  5、胡萝卜葡萄糖琼脂培养基(CDA):胡萝卜100克、葡萄糖20克、琼脂20克、水1000毫升。

  6、糯米粉糖琼脂培养基:糯米粉50克、葡萄糖15克、蔗糖15克、琼脂20克、水1000毫升。该培养基能延缓灵芝菌丝体老化和结皮。



灵芝母种培养基配方有几种?灵芝母种培养基如何制作? 

  灵芝母种培养基制作方法

  1、组分称量:按配方要求正确称取各种营养物质。

  2、汁液配制:马铃薯、胡萝卜切成丝,加水1000毫升,文火煮沸15~20分钟,4层纱布过滤取汁。糯米粉加水调成糊状,然后稀释成1000毫升悬液。

  3、培养液配制:以上制成的煮汁或悬液,按配方加入其他营养成分,并补足水至1000毫升。

  4、调整pH:用广泛pH试纸测定培养液的酸碱度,若过酸,用稀碱液1摩尔NaOH(即称取4克氢氧化钠加水100毫升)滴注调整;若过碱,则用稀酸液1摩尔HC1(即84毫升盐酸加水916毫升)调整。

  5、加凝固剂:将琼脂(若为条形需剪短)放入配液内,文火煮沸,煮时不断搅拌至溶解。

  6、分装制棉塞:用20毫米X200毫米试管分装。试管事先洗净,严防油污。新购试管因含游离碱,需用稀盐酸浸泡并清水冲洗,晒干或烘箱烘干备用。

  分装时将制备的培养基趁热倒入自制的分装器内,装量为试管长度的1/5~1/4。一般生产用少装些,保藏菌种用宜多些。分装时防止培养基沾污管口,一旦沾上应用纱布擦净。

  棉塞用未脱脂普通棉花,大小与试管口匹配,松紧适中,入试管内部分要求紧贴管壁,无缝隙、无皱褶。管内部分占棉塞总长的2/3。

  棉塞制作时,分层扯下棉花,叠成外大内小、外薄内厚的棉片,放在左手拇指与食指的虎口上,手稍呈拳状,右手拇指用力向虎口外挤压,使之露出虎口外呈球状的棉花塞头。然后,右手拿取头部,左手将尾部松散的棉花向头部方向倒褶,并使之平滑整齐,顺时针方向旋转入试管口内即成。

  7、灭菌制斜面:将制塞后的试管,每11或13支,成单数捆扎一起,棉塞端包扎塑料薄膜,防止灭菌时棉塞被冷凝水淋湿而报废。

  经高压灭菌后,除去包扎的薄膜,直立于容器或框架内,使管内水蒸气向外界蒸发,当温度下降至50度左右时(取试管1支贴放脸上,很烫但能放得住,约为50度左右),即可整捆斜放在斜面板上,斜面长度不超过管长的1/2,冷却后即凝固成斜面。若试管内培养基分装量不均匀,或试管数量不多,则单支排放成斜面。

以上就是耕种帮灵芝网的介绍,如您有更好的补充请在下方留言告诉我们。

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