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灵芝菌种如何保藏?灵芝菌种保藏方法有几种?

2020-5-9 03:50| 发布者: 食芝不倦| 查看: 104| 评论: 0

摘要:   根据菌种的生理、生化特性和遗传性的稳定性,人为地创造一个有利休眠的环境条件,将它的优良性状保存下来,以便以后重复应用。菌种保藏的基本原理是采取干燥、低温、冷冻、隔绝空气、缺乏营养以及应用保护剂或酸 ...

  根据菌种的生理、生化特性和遗传性的稳定性,人为地创造一个有利休眠的环境条件,将它的优良性状保存下来,以便以后重复应用。菌种保藏的基本原理是采取干燥、低温、冷冻、隔绝空气、缺乏营养以及应用保护剂或酸度中和剂等技术,使菌体的新陈代谢速度降低、停止繁殖和促使生命趋于休眠状态,延长保存时间,使之达到不死、不衰、不乱、不杂的目的。近期有种植灵芝的网友咨询耕种帮:灵芝菌种如何保藏?灵芝菌种保藏方法有几种?灵芝菌种保藏适宜的温度是多少度?灵芝菌种保藏时需要注意什么?以下耕种帮灵芝网就作简单介绍,供网友们参考。 



灵芝菌种如何保藏?灵芝菌种保藏方法有几种? 

  灵芝菌种低温斜面保藏法

  即冰箱试管法,它是根据低温能抑制菌丝生长的原理,将斜面菌种存放在4~6℃冰箱中,需要时将其移接至新鲜斜面上,经培养后再放入冰箱中,这种周而复始的保存方法,属于继代保藏法范畴。

  采用糯米粉糖琼脂培养基或马铃薯综合培养基,为防止产酸,糖应少加或不加,而需添加碳酸钙等缓冲剂。同时,每升培养基中还需加10毫克维生素B1,琼脂用量增加至2.5%。棉塞深入管内3厘米左右,要求紧实,灭菌后制成半高层斜面。

  斜面置30℃左右下培养2~3天作空白试验,确认无菌后,接入灵芝菌种1小块,放入25℃左右稍低的温度下培养,使菌丝生长健壮丰满,菌丝长满斜面,包扎后放入4~6℃冰箱中保藏,并做好菌名、培养基、日期、存放方位等记录,以后每3~4个月转管1次。

  保藏过程中,冰箱相对湿度保持在40%~50%,做到尽量少启用冰箱,以免产生冷凝水而引起污染,必须启用时应做到边开、边取、边关,力争短暂、快速。



灵芝菌种如何保藏?灵芝菌种保藏方法有几种? 

  灵芝菌种隔绝空气保藏法

  常采用矿油、橡皮塞密封斜面,减少水分蒸发,防止培养基干涸,避免菌丝死亡,同时在隔绝空气和缺氧下,降低了菌丝代谢,抑制其生长繁殖,达到保藏目的。

  选用化学纯液体石蜡100毫升,装入250毫升锥形瓶或盐水瓶内,加棉塞,0.103兆帕灭菌30~60分钟,然后放入160℃烘箱内烘1~2小时或40℃温箱中3天,见瓶内液体石蜡澄清透明、液层无白色膜状物,即无水分即可。然后在无菌条件下将液体石蜡倾注入试管斜面菌种上,并高出斜面顶端1厘米左右。最后直立放在洁净的室温下保藏。

  转管时直接用接种刀切取1小块菌苔,移至新鲜斜面中央,28℃下培养,多余的菌种仍在原液体石蜡中保藏。因经保藏的菌丝中有石蜡,生长较慢而弱,需再继代转接1次方可使用。

  注意保藏场所应干燥,防止棉塞受潮发霉;凡斜面暴露出液面,应及时补加液体石蜡。此法保藏时间可达1年以上,效果较好。



灵芝菌种如何保藏?灵芝菌种保藏方法有几种? 

  灵芝菌种液体保藏法

  1、生理盐水保藏:称取医用氯化钠0.7~0.9克,放入100毫升蒸馏水中,充分搅匀,分装入试管,每管5毫升,加棉塞,灭菌。将液体培养的菌丝球或片状物,用无菌滴管吸取移入试管内,每管5个(片)左右,换上无菌橡皮塞,置室温或4~6℃冰箱内保藏。本方法可存活1.5年以上。

  2、蒸馏水保藏:这是保存斜面菌种和孢子最简便的方法,可存放1年以上。操作方法是,在锥形瓶或盐水瓶内装入容量1/3左右的蒸馏水,加棉塞,灭菌、冷却后,在无菌条件下,将蒸馏水注入需保藏的新鲜斜面菌种内,加水量高出斜面顶端1~2厘米,更换上无菌橡皮塞。若保藏孢子,事先在试管内加入管长1/5~1/3的蒸馏水,加棉塞灭菌、冷却,然后将孢子铲入试管蒸馏水内,摇匀并换上无菌橡皮塞。

  上述两种方法制备后,直立放在室温下或4~6℃冰箱内保藏,中途配置补充无菌生理盐水和蒸馏水。使用时,从管内挑取菌种块或蘸取孢子悬液,移至新斜面上,原管加塞后继续保藏。



灵芝菌种如何保藏?灵芝菌种保藏方法有几种? 

  灵芝菌种天然基质保藏法

  此法取材容易、制作简单、邮寄携带方便、效果较好,因此生产实践中常被采用。

  1、木屑保藏:采用木屑麸糠培养基,分装入23厘米X200毫米粗试管内(一般试管也可用),装量约管长的2/3,加棉塞0.137兆帕保持1.5小时高压灭菌。无菌条件下接种,28℃培养,菌丝长满管后,更换无菌橡皮塞,置4~6℃冰箱中保藏。使用时挑取少许基质,移至新鲜斜面上,28℃下培养即可。

  2、甘草保藏:向中药店选购粗壮的甘草数根,放清水内浸胀,对角纵剖成两个斜面,分装入相应粗细的试管内,加棉花塞0.137兆帕保持1.5小时灭菌。无菌条件下,将需保藏的灵芝菌种移接1小块置甘草斜面上,28℃下培养,菌丝长满后,应继续培养1周,更换无菌橡皮塞,置4~6℃冰箱内保藏。使用时,直接从斜面上挑取菌丝移接。也可将斜面切削成薄片移接。

  除此,常用的尚有真空冷冻干燥、液氮超低温保藏等,它们是当前最先进的菌种保藏方法,但工序繁复,需一定的仪器设备,这里不一一介绍。至于利用滤纸、沙土管干燥保藏孢子,基于灵芝孢子萌发率不很高,同时随时间延长萌发率更低,除上面液体保藏作简要介绍外,这里也不另赘述。

以上就是耕种帮灵芝网的介绍,如您有更好的补充请在下方留言告诉我们。

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