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灵芝菌种组织别离与育种的标准

2020-9-11 19:21| 发布者: 食芝不倦| 查看: 21| 评论: 0

摘要: 灵芝菌种的分别有组织分别、孢子分别及基质内菌丝分别三种方法。基质内菌丝分别因易污染较少选用。孢子分别法在研讨及菌株复壮时选用。规划出产时选用的是子实体菌丝分别法,该法操作简练,且能坚持原有菌株的优异性 ...

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    灵芝菌种的分别有组织分别、孢子分别及基质内菌丝分别三种方法。基质内菌丝分别因易污染较少选用。孢子分别法在研讨及菌株复壮时选用。规划出产时选用的是子实体菌丝分别法,该法操作简练,且能坚持原有菌株的优异性情。

  (一)子实体菌丝分别法

  选取形状发育正常、无病虫灾、未弹射孢子的灵芝子实体,菌盖边沿尚在生长的黄白色子实体,在无菌条件下用0.1%二氯化汞水溶液(升汞水)或75%酒精进行表面擦拭灭菌。切去菌柄基部,在菌盖中部,用单面刀片或解剖刀切取米粒大菌肉一块置入试管斜面培养基中心。可分别一些试管,以供挑选。试管置26~28℃恒温箱内,培养2~3日即可见菌肉上有少量白色棉絮状菌丝长出,7~8日后菌丝可长满斜面,选取灵芝菌丝生长旺盛、均匀、皎白的试管作为试验和出产用的菌种,一般称此为第一代母种试管,可保存在冰箱中供转管运用。

  未构成菌盖的稚嫩菌柄亦可作为分别材料。



灵芝菌种组织别离与育种的标准 

  (二)孢子分别法

  取发育正常、健旺、已初步弹射孢子的灵芝子实体。切除菌柄,无菌条件下用0.1%升汞水或75%酒精进行表面消毒,用无菌水次冲刷,再用无菌棉擦拭洁净。将菌管朝下放在经灭菌的培养皿内,外罩以用75%酒精擦拭过的玻璃罩,在25~30℃条件下通过5~6小时后孢子散落在培养皿底部,用接种针挑取少量孢子放入试管斜面培养基中部,移至培养箱中进行培养。分别用的培养基可选用一般马铃薯培养基、麸皮提取液培养基等。

  孢子分别法污染率较高,应及时检查挑弃被杂菌污染的试管。待孢子萌宣告菌丝时,应连同少量培养基挑出及时移管。

  可将子实体切成蚕豆大的种块,用无菌铁钩固定后置三角瓶中,瓶底有1cm后培养基,塞上棉塞。见孢子弹射后并萌宣告菌丝时及时移管。

  野外分别灵芝孢子时因条件限制,可将菌肉(带菌管)贴在试管壁上,待孢子弹射入培养基后及时转管。

  孢子萌发后先构成一级菌丝,几天后便可构成二级菌丝。如果在显微镜下观察到锁状联合,一般即可确定为得到了灵芝菌丝。

  (三)基质内菌丝分别法

  这是运用灵芝生长的基质作为分别材料获得灵芝菌种的一种方法。其利益是在灵芝子实体已变老时仍可以获得灵芝纯菌丝体。但是,在子实体生长时,基质内的灵芝菌丝体不是单独存在的,往往和细菌、放射菌、霉菌及其他真菌生长在一起。为获得纯灵芝菌丝体,分别时留心分别材料的挑选,选灵芝菌丝生长好,菇木没有腐朽的作为分别材料。分别时接种块尽可能小些,所分别的菌种要经出菇试验确认是优异菌株才可在出产上运用。

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